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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題：SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)外源蛋白的表達(dá)
[實(shí)驗(yàn)原理]SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS—PAGE）是蛋白分析中zui經(jīng)常使用的一種方法。它是將蛋白樣品同離子型去垢劑十二烷基硫酸鈉（SDS）以及巰基乙醇一起加熱，使蛋白變性，多肽鏈內(nèi)部的和肽鏈...
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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題：聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度
（一）原理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制，因此可以形成“連續(xù)系統(tǒng)”和“不連續(xù)系統(tǒng)”兩種電泳系統(tǒng)。“不連續(xù)系統(tǒng)”zui大的特點(diǎn)在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點(diǎn)是：（1）使用兩種...
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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題：蛋白質(zhì)抽取
蛋白質(zhì)在細(xì)菌中表現(xiàn)后，以反復(fù)的冷凍-解凍方法打破細(xì)胞，再用硫酸銨把蛋白質(zhì)沉淀下來(lái)，此步驟可以去除大部份核酸、多醣、脂質(zhì)等雜物。儀器用具：恒溫震蕩培養(yǎng)箱37℃；高速冷凍離心機(jī)及離心管（使用20,000r...
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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題：folin—酚試劑法（lowry法）測(cè)蛋白質(zhì)含量
一、實(shí)驗(yàn)原理這種蛋白質(zhì)測(cè)定法是zui靈敏的方法之一。過(guò)去此法是應(yīng)用zui廣泛的一種方法，由于其試劑乙的配制較為困難（現(xiàn)在已可以訂購(gòu)），近年來(lái)逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的...
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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題：PPO粗酶液的純化
一、原理1.葡聚糖凝膠SephadexG-200凝膠柱層析利用大分子不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部zui先流出柱外，而小分子物質(zhì)進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，流速慢而zui后流出柱外，凝膠層析法能將不同分子大小的物質(zhì)分離開(kāi)...
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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題：蛋白質(zhì)測(cè)序
一、概念當(dāng)前，所謂蛋白質(zhì)測(cè)序，主要指的是蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定。蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)（Primarystructure）包括組成蛋白質(zhì)的多肽鏈數(shù)目。很多場(chǎng)合多肽和蛋白質(zhì)可以等同使用。多肽鏈的氨基酸順序，它...
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2013-12
蛋白質(zhì)技術(shù)專題：免疫球蛋白提取技術(shù)
免疫球蛋白（ImmunoglobulinIg）的含量代表著機(jī)體體液免疫的水平，并進(jìn)一步代表著B(niǎo)細(xì)胞的功能，因此測(cè)定血清Ig含量可以推知機(jī)體的體液免疫功能和診斷某些疾病引起的Ig的過(guò)高和過(guò)低。隨著免疫學(xué)...