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2017-8
原代培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)分享
經(jīng)驗(yàn)分享：1.原代細(xì)胞鋪満瓶底后棄原液，PBS沖洗2次。2.加入0.25%Trypsin-0.02%EDTA,量覆蓋瓶底即可，室溫作用，鏡下觀察至組織塊周圍的細(xì)胞回縮，立體感增強(qiáng)。3.棄去消化液，PB...
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2017-8
體外細(xì)胞的原代培養(yǎng)、凍存和復(fù)蘇，傳代培養(yǎng)
三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算1.一只小鼠可獲得（1～2.5）×108個脾細(xì)胞。2.細(xì)胞接種后一般幾小時內(nèi)就能貼壁，并開始生長，如接種的細(xì)胞密度適宜，5天到一周即可形成單層。3.一般情況，傳代后的細(xì)胞在2小時左右就...
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2017-8
體外細(xì)胞的原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、凍存和復(fù)蘇2
一、實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞培養(yǎng)可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。直接從體內(nèi)獲取的組織細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)為原代培養(yǎng)；當(dāng)原代培養(yǎng)的細(xì)胞增殖達(dá)到一定密度后，則需要做再培養(yǎng)，即將培養(yǎng)的細(xì)胞分散后，從一個容器以1：2或其他比率轉(zhuǎn)移到另...
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2017-8
定量PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)分享1
1.如果擴(kuò)增曲線ct值比較靠后的話，32左右，一般有什么方法解決沒有ct值比較靠后，對實(shí)驗(yàn)有一定的影響，因?yàn)榻?jīng)過那么多次的循環(huán)，酶的活性有可能有所下降，這時候擴(kuò)增效率會有所改變（而定量PCR的理論基礎(chǔ)...
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2017-8
實(shí)時熒光定量PCR具體實(shí)驗(yàn)步驟1
1樣品RNA的抽提①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。②兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的仿，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4...
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2017-3
單細(xì)胞凝膠電泳標(biāo)準(zhǔn)操作3
實(shí)驗(yàn)原理在細(xì)胞核中，DNA是環(huán)狀附著在核基質(zhì)上，細(xì)胞裂解過程中，核基質(zhì)被溶解、抽提，DNA的結(jié)構(gòu)則未發(fā)生變化。如果DNA鏈上存在缺口，則使DNA超螺旋變的松弛，DNA環(huán)向外展，同時由于暴露了陰電荷，在...
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2016-8
多克隆抗體的免疫電泳操作流程
實(shí)驗(yàn)原理免疫電泳又稱為γ球蛋白電泳或免疫球蛋白電泳技術(shù)，這是一種能夠判斷血液中三種免疫球蛋白IgM,IgG,IgA含量水平的實(shí)驗(yàn)方法。在這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)中，首先利用蛋白質(zhì)的分子量和所帶電荷的比值運(yùn)用水平瓊...