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2013-11
蛋白質(zhì)技術(shù)專(zhuān)題：雙向電泳操作步驟
水化上樣（被動(dòng)上樣）1.從冰箱中取出IPG膠條，室溫放置10min。2.沿水化盤(pán)槽的邊緣從左向右線(xiàn)性加入樣品，槽兩端各1cm左右不加樣，中間的樣品液一定要連貫。注意：不要產(chǎn)生氣泡，否則會(huì)影響膠條中蛋白...
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2013-11
蛋白質(zhì)技術(shù)專(zhuān)題：免疫共沉淀（Co-IP）詳細(xì)步驟教程
一、原理：免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專(zhuān)一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。其原理...
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2013-11
蛋白質(zhì)技術(shù)專(zhuān)題：蛋白質(zhì)的表達(dá)、分離和純化
目的要求（1）了解克隆基因表達(dá)的方法和意義。（2）了解重組蛋白親和層析分離純化的方法。實(shí)驗(yàn)原理克隆基因在細(xì)胞中表達(dá)對(duì)理論研究和實(shí)驗(yàn)應(yīng)用都具有重要的意義。通過(guò)表達(dá)能探索和研究基因的功能以及基因表達(dá)調(diào)控的...
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2013-11
蛋白質(zhì)技術(shù)專(zhuān)題：蛋白質(zhì)免疫印跡（Western Blot ）
標(biāo)簽：western-blot免疫印跡蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)免疫印跡（WesternBlot）可以：（1）從蛋白質(zhì)混合物中檢出目標(biāo)蛋白質(zhì)；（2）定量或定性確定細(xì)胞或組織中蛋白質(zhì)的表達(dá)情況；（3）用于蛋白質(zhì)-蛋白...
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2013-11
PCR技術(shù)專(zhuān)題：差示反轉(zhuǎn)錄PCR實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽：差示反轉(zhuǎn)錄PCR差示反轉(zhuǎn)錄PCR也稱(chēng)為mRNA差異顯示技術(shù)，它是將mRNA反轉(zhuǎn)錄技術(shù)與PCR技術(shù)二者相互結(jié)合發(fā)展起來(lái)的一種RNA指紋圖譜技術(shù)，具有簡(jiǎn)便、靈敏、RNA用量少、效率高、可同時(shí)檢測(cè)兩種...
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2013-11
PCR技術(shù)專(zhuān)題：PCR-SSP分析實(shí)驗(yàn)原理和步驟
[實(shí)驗(yàn)原理]根據(jù)決定某等位基因的堿基性質(zhì)，設(shè)計(jì)3′端*個(gè)堿基分別與各等位基因的特異性堿基相匹配的序列特異性引物，在PCR反應(yīng)過(guò)程中，只有引物3′端*個(gè)堿基與決定特定等位基因的堿基互補(bǔ)時(shí)才能實(shí)現(xiàn)DNA片...
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2013-11
PCR技術(shù)專(zhuān)題：間接原位PCR（原位雜交PCR）
與直接原位PCR所不同的是，靶基因在擴(kuò)增時(shí)不進(jìn)行標(biāo)記基團(tuán)的摻入，而是標(biāo)記一段與擴(kuò)增片段互補(bǔ)的探針，在擴(kuò)增結(jié)束后，應(yīng)用此探針進(jìn)行原位雜交。因此，此處主要介紹原位雜交，其余方法同原位PCR。一、預(yù)雜交1....