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2013-10
細胞轉(zhuǎn)染:脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的幾個實驗方法
摘要:本實驗介紹了脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的幾個方法。實驗原理脂質(zhì)體(LR)試劑是陽離子脂質(zhì)體DOTMA和DOPE的混合物(1:1)。它適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細胞中,是目前條件下zui方面的轉(zhuǎn)染方法之一...
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2013-10
細胞轉(zhuǎn)染實驗
一、實驗目的學習和掌握外源基因?qū)胝婧思毎闹饕椒ā|(zhì)體介導的轉(zhuǎn)染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白),為染色準備實驗材料。二、實驗原理上圖所示是脂質(zhì)體介導轉(zhuǎn)染的示...
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2013-10
感受態(tài)制備:大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備、重組DNA的轉(zhuǎn)化、克隆篩選
1.實驗目的和要求通過本實驗學習氯化鈣法制備大腸桿菌感受態(tài)細胞和外源質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)入受體菌細胞的技術(shù)以及篩選轉(zhuǎn)化體的技術(shù)。了解細胞轉(zhuǎn)化的概念及其在分子生物學研究中的意義。2.相關(guān)知識及原理感受態(tài)細胞(C...
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2013-10
RNA實驗技術(shù):核糖核酸酶保護分析
一、體外轉(zhuǎn)錄在無菌1.5ml微型離心管中,結(jié)合以下內(nèi)容:4ul5倍轉(zhuǎn)錄緩沖液2ul0.1MDTT4ul2.5MMNTP(A,C,G)0.8ulRNA酶抑制劑(25U/ul)RNA酶抑制劑(Promeg...
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2013-10
RNA實驗技術(shù):細胞質(zhì)RNA提取實驗
標簽:細胞質(zhì)RNA由于RNA的種類來源很多,因而提取制備方法各異,一般有苯酚法,去污劑法和鹽酸胍法,其中苯酚法實驗室zui常用。組織勻漿后用苯酚處理離心,RNA即溶于上層被酚飽和的水相中,向水相加冷乙...
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2013-10
RNA實驗技術(shù):Northern blot實驗
標簽:NorthernblotNorthernblot是一種通過檢測RNA的表達水平來檢測基因表達的方法,通過northernblot的方法可以檢測到細胞在生長發(fā)育特定階段或者脅迫或病理環(huán)境下特定基因...
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2013-10
RNA實驗技術(shù):RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳實驗原理、材料和操作步驟
一、實驗目的學習RNA瓊脂糖凝膠電泳的使用技術(shù)。二、實驗原理RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中,可以分離混合物中不同分子量的RNA分子,凡是無法確定分子量。只有在變性情況下,R...