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2013-10
RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù):RNAi實(shí)驗(yàn)原理與方法選擇
一、RNAi的分子機(jī)制通過(guò)生化和遺傳學(xué)研究表明,RNA干擾包括起始階段和效應(yīng)階段(inititationandeffectorsteps)。在起始階段,加入的小分子RNA被切割為21-23核苷酸長(zhǎng)的小...
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2013-10
RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù):RNA的瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)原理和步驟
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆罩参锟俁NA非變性膠電泳的原理和方法。二、實(shí)驗(yàn)原理RNA電泳可以在變性及非變性兩種條件下進(jìn)行。非變性電泳使用1.0%--1.4%的凝膠,不同的RNA條帶也能分開,但無(wú)法判斷其分子量。只...
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2013-10
RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù):肝臟細(xì)胞RNA的提取
一.原理RNA提取技術(shù)不僅是分子生物學(xué)技術(shù)的重要組成部分,也是功能基因組學(xué)科研技術(shù)的重要基礎(chǔ)。從RNA水平研究生物體內(nèi)基因的調(diào)控機(jī)制,已成為分子生物學(xué)研究的一個(gè)重要手段。對(duì)某一生物或組織進(jìn)行性狀研究,...
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2013-10
RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù):RNAi表達(dá)載體構(gòu)建
近年來(lái)的研究表明,一些短片斷的雙鏈RNA可以通過(guò)促使特定基因的mRNA降解來(lái)、特異的阻斷體內(nèi)特定基因表達(dá),誘使細(xì)胞表現(xiàn)出特定基因缺失的表型,稱為RNA干擾(RNAinterference,RNAi)....
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2013-10
RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù):總RNA的提取
完整RNA的提取和純化,是進(jìn)行RNA方面的研究工作,如Nothern雜交、mRNA分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有RNA的提取過(guò)程中都有五個(gè)關(guān)鍵點(diǎn),即1):樣品細(xì)胞...
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2013-10
RNA實(shí)驗(yàn)技術(shù):TRIzol RNA提取方法
TRIzolRNA提取試劑盒是由GIBCOBRL公司推出提取RNA的產(chǎn)品,其操作方便、快捷。在TRIzol中,RNA是隔離在RNA酶污染之外的。而對(duì)樣品的后續(xù)操作會(huì)要求用無(wú)RNA酶的非一次性的玻璃器皿...
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2013-10
DNA實(shí)驗(yàn)技術(shù):質(zhì)粒DNA限制性酶切圖譜分析
一、DNA的限制性酶切實(shí)驗(yàn)原理核酸限制性內(nèi)切酶是一類能識(shí)別雙鏈DNA中特定堿基順序的核酸水解酶,這些酶都是從原核生物中發(fā)現(xiàn),它們的功能猶似高等功物的免疫系統(tǒng),用于抗擊外來(lái)DNA的侵襲。限制性內(nèi)切酶以內(nèi)...