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2013-8
DNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：原位雜交實(shí)驗(yàn)要求及步驟2
三、操作步驟（一）取材、冰凍切片：將動(dòng)物以3%戊巴比妥鈉麻醉，打開胸腔，暴露心臟，刺破右心耳，將針尖刺入左心室用生理鹽水灌注（灌注量約為動(dòng)物體重的2倍），再注入等量的4%多聚甲醛。（見圖2-7）。取材...
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2013-8
DNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：原位雜交實(shí)驗(yàn)要求及步驟1
原位雜交組織（或細(xì)胞）化學(xué)（InsituHybridizationHistochemistry，ISHH）簡稱原位雜交（InSituHybridization），屬于固相分子雜交的范疇，它是用標(biāo)記的D...
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2013-7
DNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：限制性內(nèi)切酶消化DNA實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽：限制性內(nèi)切酶消化DNA影響限制性內(nèi)切酶反應(yīng)的因素很多。DNA制品中的污染均能抑制酶切活性。這種抑制可通過增加酶作用單位數(shù)、增大反應(yīng)體枳以稀釋可能的抑制劑或延長反應(yīng)時(shí)間來加以克服。實(shí)驗(yàn)方法單酶單D...
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2013-7
DNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：DNA斑點(diǎn)和狹線印跡實(shí)驗(yàn)
斑點(diǎn)和狹線印跡是一種將混合的未經(jīng)分離的面定于硝酸纖維素膜或尼龍膜上進(jìn)行雜交分析的簡單技術(shù)。用來檢測被印跡的1DNA制品中靶序列的相對豐度。實(shí)驗(yàn)方法多樣抽濾法實(shí)驗(yàn)材料DNA試劑、試劑盒SSCNaClNa...
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2013-7
DNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：重組質(zhì)粒的連接、轉(zhuǎn)化及篩選
*節(jié)概述質(zhì)粒具有穩(wěn)定可靠和操作簡便的優(yōu)點(diǎn)。如果要克隆較小的DNA片段（＜10kb）且結(jié)構(gòu)簡單,質(zhì)粒要比其它任何載體都要好。在質(zhì)粒載體上進(jìn)行克隆,從原理上說是很簡單的，先用限制性內(nèi)切酶切割質(zhì)粒DNA和目...
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2013-7
DNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：DNA的酶切實(shí)驗(yàn)
采用粘末端連接必須對目的DNA分子和載體分子進(jìn)行酶切以獲得相應(yīng)的粘末端進(jìn)行連接。酶切可以是單酶切也可以是雙酶切。單酶切操作比較簡單，但雙酶切如果兩種酶所用緩沖液成分不同（主要是鹽離子濃度不同）或反應(yīng)溫...
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2013-7
DNA實(shí)驗(yàn)技術(shù)：亞硫酸氫鹽修飾后測序法檢測甲基化
甲基化檢測方法（亞硫酸氫鹽修飾后測序法）甲基化是目前的研究熱點(diǎn)，就我所做的一點(diǎn)工作并其中一點(diǎn)心得，與大家分享。希望能夠?qū)Υ蠹矣兴鶐椭?部分基因組DNA的提取。這一步?jīng)]有懸念，*可以購買供細(xì)胞或組織使...