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細(xì)胞技術(shù)專題：細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
更新時(shí)間：2014-02-18 瀏覽次數(shù)：1023
材料：
6孔板
marker筆
直尺
20微升槍頭（滅菌）
無(wú)血清培養(yǎng)基
PBS
準(zhǔn)備：
所有能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺(tái)內(nèi)）
流程：
1、先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻地劃?rùn)M線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過(guò)孔。每孔至少穿過(guò)5條線。
2、在空中加入約5X105個(gè)細(xì)胞，具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，掌握為夜能鋪滿。
3、第二天用槍頭比著直尺，盡量垂直于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不要傾斜。
4、用PBS洗細(xì)胞3次，去除劃下的細(xì)胞，加入無(wú)血清培養(yǎng)基。
5、放入37℃5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。按0、6、12、24小時(shí)取樣，拍照。