細胞技術(shù)專題:腫瘤細胞的軟瓊脂集落培養(yǎng)實驗
更新時間:2014-02-20 瀏覽次數(shù):1491
標(biāo)簽: 腫瘤 軟瓊脂 集落
在體外培養(yǎng)基中由一個祖先細胞增殖形成的細胞團,稱之為集落。腫瘤細胞能無限繁殖,所以具有這種能力,而成熟分化的細胞則不能形成集落。
實驗方法
- 基本方案
實驗方法原理 | HL-60細胞是一種急性早幼粒細胞白血病細胞,在體外無需加刺激因子,可在軟瓊脂培養(yǎng)基中形成集落。二甲基亞砜是一種細胞分化誘導(dǎo)劑,經(jīng)二甲基亞砜處理后的HL-60細胞按粒系途徑定向成熟分化,同時細胞的增殖力降低,幾乎全部細胞喪失了軟瓊脂中形成集落的能力。因此,這種方法可用于細胞分化的基礎(chǔ)研究和臨床腫瘤治療的療效檢驗等方面。 |
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實驗材料 | HL-60細胞 |
試劑、試劑盒 | 小牛血清 RPMI1640培養(yǎng)液 臺盼蘭 瓊脂 二甲基亞砜 |
儀器、耗材 | 超凈工作臺 二氧化碳培養(yǎng)箱 顯微鏡 培養(yǎng)瓶 吸管 酒精燈 血細胞計數(shù)板 多孔培養(yǎng)板 |
實驗步驟 | 1. 收集對數(shù)生長期的HL-60細胞,先按實驗十三測定細胞活力,然后調(diào)整細胞濃度,制成300~1 000活細胞/ml 的細胞懸液。
6. 然后移培養(yǎng)板或平皿于CO2培養(yǎng)箱中37℃進行培養(yǎng)。
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